摘要
胶体微晶纤维素(avicel)是一种由微晶纤维素(microcrystalline cellulose,MCC)和羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)制成的混合物,可用于病毒蚀斑测定.常用的avicel由FMC公司生产,其MCC和CMC比例相对固定,无法很好地适应所有类型病毒的蚀斑测定实验.本研究通过对比不同的MCC和CMC配制比例对avicel在病毒蚀斑测定作用的影响,建立了一种操作简便、实用性好和稳定性好的改良avicel病毒蚀斑测定法.为了配制不同浓度MCC和CMC的混合物,本研究制备出12种2×avicel覆盖层,测定其总体黏度及底层黏度,评估其与传统覆盖层相比,使用时的操作难易程度.进一步将12种2×avicel覆盖层制备成avicel-DMEM营养覆盖层,测定96孔板中猪流行性腹泻病毒滴度,比较12种avicel覆盖层及传统覆盖层蚀斑大小、清晰度、稳定性及滴度准确性等的差异,筛选出最佳测定方法.结果显示,12种2xavicel覆盖层中,除4.8％MCC+1.4％CMC和4.8％MCC+1.0％CMC外,其余2×avicel覆盖层在实际使用中均比2xCMC覆盖层更容易吸取和配制营养覆盖层.最后,利用avicel病毒蚀斑测定法测定96孔板中猪流行性腹泻病毒滴度,结果显示CMC浓度越高蚀斑越小,其中终浓度为0.6％MCC+0.7％CMC的avicel覆盖层测定蚀斑染色最清晰,准确度与传统覆盖层相似,但操作较传统覆盖层更简便.综上所述,本研究建立了一种操作简便、实用性好和稳定性好的改良avicel病毒蚀斑测定法,为病毒的病原学、抗病毒药物及疫苗等相关研究的展开提供了良好的实验基础.
基金项目
重庆荣昌农牧高新技术产业研发专项(cstc2020ngzx0001)
重庆市自然科学基金(cstc2021jcyj-msxmX0881)
重庆市科研机构绩效激励引导专项(cstc2021jxj10017)
NETL
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