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麦芽糖诱导梯度强度启动子的定向进化改造

Directed evolution of maltose induced promoters with expanded gradient intensity

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不同灵敏度与响应强度的启动子在基因表达调控与代谢工程改造中应用广泛.为筛选不同诱导表达强度的启动子元件,本研究以麦芽糖诱导启动子Pgivc为对象,通过易错PCR方法对麦芽糖诱导型启动子进行突变获得启动子突变体库,然后基于四环素筛选的细胞生长偶联方法对突变体进行高效筛选,获得了不同响应范围和强度的启动子突变体,最终得到的诱导型启动子突变体(MT2、MT3、MT4、MT6)对麦芽糖诱导剂的响应范围从0-3 g/L扩展至0-15 g/L,其中最高诱导表达强度菌株(MT8)较原始启动子菌株的绿色荧光蛋白表达水平提高约3.15倍,有利于进一步拓展梯度强度启动子在枯草芽孢杆菌代谢工程和合成生物学中的应用.

张国强、滕茂放、刘松、周景文、李江华、堵国成

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江南大学未来食品科学中心,江苏无锡214122

江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏无锡214122

江南大学生物工程学院,江苏无锡214122

诱导启动子 麦芽糖 定向进化 梯度强度 枯草芽孢杆菌

国家重点研发计划国家自然科学基金

2019YFA0900490032172153

2022

10.13345/j.cjb.220251

生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-3061
年,卷(期)：2022.38(7)
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