摘要
为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制,文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1914bp的启动子片段(3AP).将该启动子5′末-端截短获得5个片段(3AP1-3AP5),长度分别为1 729、1 379、666、510.179 bp.构建了将这6个启动子片段与gus基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草.对转基因烟草进行GUS表达分析和酶活性检测,结果表明,在转入各启动子片段的烟草中,都能检测到gus基因的表达,其中全长启动子3fP的驱动活性最弱,而截短片段3f-P3的驱动活性最强.对转基因烟草进行盐胁迫处理后,3f-P、3f-P1、3AP2和3AP3所驱动GUS酶活性是未经盐诱导的3.3、1.2、1.9、1.2倍,表明AhRabG3f启动子是盐诱导型的,在3f-P至3f-P3之间可能存在对盐响应的正调控元件.通过对盐胁迫处理后各启动子片段驱动的GUS活性分析,推测在AhRabG3f启动子上游1 930-1 745 bp、682-526 bp之间存在可能对盐响应的正调控元件MYB、GT1和富含TC的重复序列,1 395-682 bp之间存在可能对盐响应的负调控元件MYC.研究结果可为利用诱导型启动子调控花生的耐盐性提供指导.