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一种基于流式细胞术的牛多细胞因子检测方法

Development of a flow cytometry method for detection of bovine multi-cytokines

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本研究旨在建立一种基于流式细胞术的牛多细胞因子检测方法.对前期制备并筛选出的针对牛细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α、IP-10和MCP-1的单克隆抗体进行荧光标记,与细胞表面分子抗体组合搭配,进行牛多细胞因子流式检测方法的建立和优化.随后利用建立的方法进行BCG体外感染牛外周血单个核细胞的细胞因子表达规律测定,并结合CFP10-ESAT6蛋白刺激剂评价上述细胞因子作为牛结核诊断标识的潜力.建立的牛多细胞因子流式检测方法可以有效测定BCG感染牛外周血T淋巴细胞的细胞因子表达,其中IFN-γ、IL-2、TNF-α在感染40 h后持续上升,而IP-10和MCP-1表达水平呈现下降趋势;对于牛外周血CD4+T淋巴细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α的联合检测能有效区分牛结核阳性和阴性样品.这一方法为牛病原菌感染、疫苗注射后细胞免疫应答水平评价以及疫病诊断提供了重要技术手段.

朱兆成、夏爱鸿、曹兆立、李昕、陈祥、徐正中、焦新安

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牛细胞因子 胞内染色 流式细胞术 细胞免疫应答 疫病诊断

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2021YFD1800403BK20201432CX211004BE2021331

2023

10.13345/j.cjb.220263

生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-3061
年,卷(期)：2023.39(1)
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