生物化工2024,Vol.10Issue(4) :49-52,57.

表达驱动蛋白KIF4A磷酸化突变体蛋白重组杆状病毒的构建

Construction of Recombinant Baculovirus Expressing KIF4A Phosphorylation Mutant Proteins

魏雅婷 李心怡 朱长军
生物化工2024,Vol.10Issue(4) :49-52,57.

表达驱动蛋白KIF4A磷酸化突变体蛋白重组杆状病毒的构建

Construction of Recombinant Baculovirus Expressing KIF4A Phosphorylation Mutant Proteins

魏雅婷 1李心怡 1朱长军1
扫码查看

作者信息

  • 1. 天津师范大学 生命科学学院,天津 300387;天津动植物抗性重点实验室,天津 300387
  • 折叠

摘要

目的:探究驱动蛋白家族成员 4A(KIF4A)在细胞有丝分裂早期调控染色质凝缩的作用机制.方法:本研究构建表达KIF4A磷酸化突变体蛋白的重组质粒,转化DH10Bac感受态细胞,蓝白斑筛选后提取重组杆状病毒基因组,转染Sf9 细胞并培养以获得病毒液.结果:通过昆虫杆状病毒表达系统成功获得表达KIF4A突变体蛋白的病毒液.结论:本研究为后续大量表达及体外纯化KIF4A突变体蛋白奠定了实验基础.

Abstract

Objective:Exploring the mechanism of kinesin family member 4A(KIF4A)in regulating chromatin condensation during early cell mitosis.Methods:In this study,a recombinant plasmid expressing KIF4A phosphorylated mutant protein is constructed and transformed into DH10Bac competent cells.After blue and white spot screening,the recombinant baculovirus genome is extracted,transfected into Sf9 cells,and cultured to obtain virus solution.Results:The viral solution expressing KIF4A mutant protein is successfully obtained through the insect baculovirus expression system.Conclusion:This study lays the experimental foundation for the subsequent large-scale expression and in vitro purification of KIF4A mutant protein.

关键词

驱动蛋白/KIF4A/点突变/杆状病毒

Key words

kinesin/KIF4A/point mutation/baculovirus

引用本文复制引用

基金项目

天津市多元投入基金重点项目(21JCZDJC00960)

出版年

2024
生物化工

生物化工

ISSN:
参考文献量5
段落导航相关论文