选取温敏花椰菜不育系GS-19与GS-31杂交组合的F2高可育和高不育单株构建基因池,利用100对随机引物对其进行RAPD标记.同时,采用正交设计对其反应体系及扩增条件进行优化.试验结果表明,在25 μL反应体系中含dNTPs 0.625 mmol/L,引物0.5 μmoL/L,DNA模板60 ng,Taq酶1.5 U,超纯水14.9μL;反应条件为94℃预变性4 min,然后进行94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环后,再72℃延伸7 min,花椰菜RAPD扩增效果较好.P21-1800为花椰菜温敏雄性不育基因的连锁标记.
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