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大肠杆菌nmpC基因的快速敲除

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旨在利用Red重组系统和Xer重组系统获得大肠杆菌NmpC外膜蛋白基因删除菌株.采用PCR扩增nmpC基因片段,构建pMD-nmpC载体,EcoR Ⅰ酶切并经Pfu补平酶切缺口后与difGm片段连接,得到重组质粒T-nmpC::difGm,PCR扩增获得突变盒nmpC::difGm,电转化突变盒片段入大肠杆菌细胞,PCR扩增验证是否获得没有抗性标记的△nmpC基因删除菌株.结果显示,成功构建了重组质粒T-nmpC::difGm,在Red重组酶和Xer重组酶的介导下,进行同源重组和抗生素标记去除,并经PCR验证得到△ nmpC基因删除菌株.首次成功获得大肠杆菌△nmpC无抗生素标记基因删除菌株,该基因删除菌株可为深入研究NmpC的功能提供研究基础.
Rapid Deletion of nmpC Gene in Escherichia coli Chromosome

张丹凤、陈国平、华秀庭、陈阳

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漳州师范学院生物科学与技术系,漳州363000

漳州市农业局种植业管理站,漳州363000

Red重组系统 Xer重组系统 大肠杆菌 NmpC

福建省自然科学基金漳州市自然科学基金

2010J05088zz2012J05

2013

生物技术通报
中国农业科学院农业信息研究所

生物技术通报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.505
ISSN：1002-5464
年,卷(期)：2013.(5)
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