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烟草甲体内烟碱降解菌的筛选、鉴定及降解特性

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从烟草甲体内筛选鉴定烟碱降解菌,并对其降解特性进行探索研究.通过梯度稀释法从烟草甲体内分离筛选出烟碱降解菌,并利用 4 种烟叶培养基进行复筛.通过 16S rRNA基因测序以及生理生化实验进行菌种鉴定;通过全基因组序列分析和验证探究菌株的生物特性.再通过分子对接及RT-qRCR探究其生物学特性和应用潜力.从烟草甲中分离到 1 株显著降解烟碱的优势菌株J1,16S rRNA基因同源性和生化特征分析鉴定为Mixta,不同酶活性检测结果显示J1 不产β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶.烟碱降解菌通过数据库进行功能注释,发现了菌株上存在的烟碱代谢通路以及烟碱代谢关键基因或酶,选择吡啶途径中J1 具有的烟碱脱氢酶(NDH)进行分子对接和功能验证.通过RT-qPCR验证,1 g/L烟碱诱导J1 24 h,与对照相比,ndh基因相对表达量上调 15.978 倍.0.8%烟叶浸提液诱导J1 24 h,与对照相比,ndh基因相对表达量上调 1.117 倍.在烟草甲体内分离筛选高效降解烟碱细菌J1,验证了降解相关基因的功能,为烟碱降解菌的筛选提供了新思路,同时,丰富了降解烟碱微生物资源.
Screening,Identification and Degradation Characteristics of Nicotine-degrading Bacteria in Lasioderma serricorne

王羽、尹铭绅、尹晓燕、奚家勤、杨建伟、牛秋红

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南阳师范学院生命科学与农业工程学院,南阳 473000

河南省郑州市烟草研究院,郑州 450001

烟草甲内生菌 Mixta属 烟碱耐受 烟碱降解 降解机理

河南省能源微生物资源可持续利用创新型科技团队项目

2023

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-1198

生物技术通报
中国农业科学院农业信息研究所

生物技术通报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.505
ISSN：1002-5464
年,卷(期)：2023.39(6)
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