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抗流感病毒单克隆抗体CR6261在糖基工程酵母中的表达及分析

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目的:在糖基工程酵母中表达抗流感病毒单克隆抗体CR6261,并对其进行结构分析和活性测定.方法:从GenBank获得CR6261抗体的全基因序列,构建轻重链表达载体pPICZα-CR6261-H-L,电转入糖基工程酵母,利用甲醇诱导型启动子AOX1表达CR6261抗体蛋白,通过SDS-PAGE、Western印迹筛选表达菌株,用Protein A亲和层析、Superdex200凝胶过滤柱分离纯化抗体蛋白,应用ELISA方法对纯化后的蛋白进行活性鉴定.结果:CR6261抗体蛋白分泌在培养上清中,且纯化后的蛋白与糖基工程酵母表达的流感病毒血凝素蛋白HA5、HA7有结合活性,与商业化三价流感病毒裂解疫苗亦有结合活性.结论:实现了抗流感病毒单克隆抗体CR6261在糖基工程酵母中的表达,并初步检测了其广谱活性,可为酵母表达抗体蛋白药物制备提供参考,ELISA初步评价还显示了其在诊断上的应用前景.
Expression and Characterization of Anti-Influenza Monoclo⁃nal Antibody CR6261 in Glycoengineered Pichia pastoris

李响、石萍萍、王甜甜、刘波、吴军

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辽宁大学 生命科学学院,辽宁 沈阳 110036

军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071

安徽大学 物质科学与信息技术研究院,安徽 合肥 230000

流感病毒 单克隆抗体 CR6261 糖基工程酵母 流感病毒血凝素

重大新药创制科技重大专项国家自然科学基金国家自然科学基金

2018ZX09101005-013-0028177361981673339

2020

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(1)
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