生物技术通讯2020,Vol.31Issue(1) :39-43.

乙醛脱氢酶在乳酸乳球菌中的表达与纯化

Expression and Purification of Acetaldehyde Dehydrogenase in Lactococcus lactis

张丹雨 陈洋洋 刘晓阳 王佳星 张惟材 卜宁 熊向华
生物技术通讯2020,Vol.31Issue(1) :39-43.

乙醛脱氢酶在乳酸乳球菌中的表达与纯化

Expression and Purification of Acetaldehyde Dehydrogenase in Lactococcus lactis

张丹雨 1陈洋洋 2刘晓阳 3王佳星 1张惟材 4卜宁 5熊向华4
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作者信息

  • 1. 沈阳师范大学 生命科学学院,辽宁 沈阳 110034;军事医学研究院 生物工程研究所,北京100071
  • 2. 军事医学研究院 生物工程研究所,北京100071;哈尔滨商业大学,黑龙江 哈尔滨 150076
  • 3. 军事医学研究院 生物工程研究所,北京100071;沈阳药科大学,辽宁 沈阳 110016
  • 4. 军事医学研究院 生物工程研究所,北京100071
  • 5. 沈阳师范大学 生命科学学院,辽宁 沈阳 110034
  • 折叠

摘要

目的:在乳酸乳球菌中重组表达乙醛脱氢酶(ALDH).方法:合成毕赤酵母ALDH基因,PCR扩增后通过重组构建pNZ8048-ALDH表达载体,电转至乳酸乳球菌NZ9000感受态,Nisin诱导表达后经Ni柱亲和层析纯化ALDH蛋白,比色法测定酶活.结果:构建了pNZ8048-ALDH表达载体,在乳酸乳球菌NZ9000中实现了ALDH的重组表达,目的蛋白占全菌蛋白的17.2%,其中可溶性表达比例为53%,重组菌株ALDH活力为0.638 U/mL,亲和层析纯化蛋白纯度约70%,比活为0.48 U/mg.结论:在乳酸乳球菌中表达并纯化获得了有活性的ALDH.

关键词

乙醛脱氢酶/乳酸乳球菌/表达

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出版年

2020
生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子:0.385
ISSN:1009-0002
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参考文献量7
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