摘要
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对人肺支气管上皮细胞(HBEC)的细胞形态和上皮间质转化(EMT)标志基因表达的影响.方法:TGF-β1处理HBEC 0、1、2、3、4和5 d,观察细胞形态;运用免疫荧光实验,观察TGF-β1处理HBEC 4 d时的细胞骨架;TGF-β1分别处理0、1、3、6 h和0、1、2、3、4、5 d,提取总RNA后反转录并进行实时荧光定量PCR检测EMT标志基因α-SMA、β-catenin、SNAI1和E-cadherin的mRNA表达情况.结果:TGF-β1处理HBEC 2 d时就能够引起类似EMT的形态改变,在处理3、4和5 d时细胞形态改变尤为明显,大多数细胞变为纺锤形;免疫荧光实验结果显示,细胞骨架的分布随细胞形态发生改变;实时荧光定量PCR结果显示,SNAI1在3 h和E-cadherin在6 h的mRNA表达量显著升高;α-SMA和β-catenin的mRNA表达量在各时间点均显著降低;SNAI1和E-cadherin的mRNA表达量在1 d时显著升高,随后各时间点mRNA表达量都呈现不同程度的下降,SNAI1在3和4 d时mRNA表达量显著降低,α-SMA在2、4和5 d时mRNA表达量显著降低;E-cadherin各时间点mRNA表达量都呈现不同程度的降低,2、3和5 d的mRNA表达量显著降低;β-catenin的mRNA表达量在不同时间点均无显著变化.结论:TGF-β1刺激HBEC可观察到发生类似EMT的细胞形态改变,但EMT标志基因mRNA的表达量变化反复.
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