生物技术通讯2020，Vol.31Issue(3) ：257-261.DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2020.03.001

表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因小鼠模型的建立和鉴定

Establishment and Identification of a Mouse Model Express-ing HIV-1 CRF01_AE Structural Gene

郭婷婷 岳成 徐柯 周玉柏
生物技术通讯2020，Vol.31Issue(3) ：257-261.DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2020.03.001
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表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因小鼠模型的建立和鉴定

Establishment and Identification of a Mouse Model Express-ing HIV-1 CRF01_AE Structural Gene

郭婷婷 1岳成 1徐柯 2周玉柏3
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作者信息

  • 1. 北京工业大学 生命科学与生物工程学院,北京 100124;中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所,北京 100052
  • 2. 中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所,北京 100052
  • 3. 北京工业大学 生命科学与生物工程学院,北京 100124
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摘要

目的:构建并鉴定表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因的小鼠模型.方法:使用哺乳动物密码子优化的HIV-1 CRF01_AE gp160基因,通过慢病毒包装系统构建重组慢病毒LV-GFP-AE gp160,将上述重组慢病毒感染小鼠肺上皮细胞TC-1,经嘌呤霉素抗性筛选获得稳定表达gp160基因的TC-1细胞.采用RT-PCR、流式细胞术检测gp160基因在细胞内的表达稳定性,将稳定表达Gp160蛋白的TC-1-HIV AE gp160细胞接种小鼠,用免疫组化方法检测小鼠体内细胞团块中HIV Gp160蛋白的表达.结果:菌落PCR、酶切鉴定和测序表明重组质粒pLVX-AE gp160构建正确,RT-PCR、GFP荧光及流式细胞术结果均显示gp160基因能在细胞TC-1中稳定表达,免疫组化结果也表明小鼠体内接种的细胞可以稳定表达HIV Gp160蛋白.结论:建立了稳定表达HIV-1 CRF01_AE亚型Gp160蛋白的TC-1细胞及小鼠模型,为HIV-1 CRF01_AE亚型HIV疫苗的临床前研究提供了可靠的体外、体内免疫原性评价工具,为该疫苗的进一步开发奠定了坚实的实验基础.

关键词

HIV-1/CRF01_AE亚型/疫苗评价/免疫原性

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基金项目

艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治国家科技重大专项(2018ZX10731101-002)

出版年

2020
生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
浏览量3
参考文献量1
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