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新型冠状病毒N蛋白原核可溶性表达与血清学评价

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目的:利用原核系统可溶性表达新冠病毒(SARS-CoV-2)N蛋白,评价其在血清学诊断上的可行性.方法:将SARS-CoV-2 N蛋白对应的核酸表达序列克隆到载体pET-DsbC上,经原核表达和亲和纯化获得可溶性DsbC-N融合蛋白,通过ELISA试验检测30份确诊新冠肺炎患者、50份健康人血清,评价重组DsbC-N蛋白在新冠肺炎患者血清学诊断中的应用价值.结果:DsbC-N融合蛋白在原核表达系统中以可溶性形式表达,经亲和层析纯化后相对分子质量为68×103,纯度为92％.ELISA结果显示纯化后的DsbC-N蛋白与新冠肺炎患者血清有较强的反应,血清学诊断敏感性为96％,特异性为98％.结论:原核可溶性表达的DsbC-N蛋白经纯化后在新冠肺炎诊断方面具有很高的应用价值,可以作为诊断抗原用于检测患者血清中的抗体.
Prokaryotic Soluble Expression and Serological Evaluation of SARS-CoV-2 N Protein

侯江厚、孙卫国、黄国红、詹晓燕、杨奕梅

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昆明市妇幼保健院,云南 昆明 650013

解放军总医院 第八医学中心,北京 100091

新型冠状病毒 N蛋白 可溶性表达 酶联免疫吸附试验

2020

10.3969/j.issn.1009-0002.2020.04.009

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(4)
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