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TNF-α诱导的NF-κB慢病毒报告基因系统的构建

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目的:构建一种肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB慢病毒报告基因系统.方法:以NF-κB信号通路为基础,设计并构建含有NF-κB响应元件和mCherry报告基因序列的表达载体,并进一步建立受NF-κB调控表达mCherry的细胞株,最后使用TNF-α进行刺激验证.结果:质粒经过双酶切鉴定,得到约1500 bp的目的片段,符合预计大小且测序分析正确,表明质粒构建成功;在TNF-α刺激实验中,NF-κB信号通路的刺激物TNF-α作用于构建的NF-κB调控表达mCherry荧光蛋白的细胞株后出现特异性荧光反应,TNF-α诱导组的细胞有较强的mCherry表达,阳性率约为90％,而未加TNF-α组细胞mCherry阳性表达率约为10％.结论:构建了受NF-κB调控稳定表达mCherry的慢病毒报告基因系统,可用于对NF-κB活化效果的检测及筛选,具有普适性的应用价值.
Construction of TNF-α-Induced NF-κB Lentiviral Report⁃er Gene System

周晨辰、查玉华、张硌

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解放军总医院 第五医学中心南院区医学工程科,北京 100071

肿瘤坏死因子α(TNF-α) NF-κB 慢病毒报告基因

北京市自然科学基金

5192021

2020

10.3969/j.issn.1009-0002.2020.04.013

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(4)
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