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重组猪胰蛋白酶原及其突变体在毕赤酵母X33中的组成型表达

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目的:设计以PGAP为启动子的组成型质粒,构建高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得重组猪胰蛋白酶.方法:首先将质粒转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,电转化至毕赤酵母X33,表达重组猪胰蛋白酶原,经肠激酶激活,纯化提取得到重组猪胰蛋白酶.结果:筛选到高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得了重组猪胰蛋白酶.结论:以PGAP为启动子的质粒,转化毕赤酵母X33后表达的重组猪胰蛋白酶原避免了补加甲醇带来的危害,且操作方便,大大缩短了周期,提高了生产效率,避免了动物源性污染.
Constitutive Expression of Recombinant Porcine Trypsinogen and its Mutant in Pichia pastoris X33

窦俊、方宏清、徐登圆、赵珊珊、陈慧梅、徐晓峰、支艳艳、李晓稳、文良柱

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中国药科大学,江苏 南京 211198

江苏万邦医药科技有限公司,江苏 徐州 221004

江苏万新医药科技(苏州)有限公司,江苏 苏州 215000

毕赤酵母X33 重组猪胰蛋白酶原 重组猪胰蛋白酶 酵母表达

2020

10.3969/j.issn.1009-0002.2020.05.002

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(5)
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