生物技术通讯2020，Vol.31Issue(5) ：511-516,560.DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2020.05.002

重组猪胰蛋白酶原及其突变体在毕赤酵母X33中的组成型表达

Constitutive Expression of Recombinant Porcine Trypsinogen and its Mutant in Pichia pastoris X33

窦俊 方宏清 徐登圆 赵珊珊 陈慧梅 徐晓峰 支艳艳 李晓稳 文良柱
生物技术通讯2020，Vol.31Issue(5) ：511-516,560.DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2020.05.002
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重组猪胰蛋白酶原及其突变体在毕赤酵母X33中的组成型表达

Constitutive Expression of Recombinant Porcine Trypsinogen and its Mutant in Pichia pastoris X33

窦俊 1方宏清 2徐登圆 1赵珊珊 2陈慧梅 3徐晓峰 2支艳艳 2李晓稳 2文良柱2
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作者信息

  • 1. 中国药科大学,江苏 南京 211198;江苏万邦医药科技有限公司,江苏 徐州 221004
  • 2. 江苏万邦医药科技有限公司,江苏 徐州 221004
  • 3. 江苏万新医药科技(苏州)有限公司,江苏 苏州 215000
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摘要

目的:设计以PGAP为启动子的组成型质粒,构建高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得重组猪胰蛋白酶.方法:首先将质粒转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,电转化至毕赤酵母X33,表达重组猪胰蛋白酶原,经肠激酶激活,纯化提取得到重组猪胰蛋白酶.结果:筛选到高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得了重组猪胰蛋白酶.结论:以PGAP为启动子的质粒,转化毕赤酵母X33后表达的重组猪胰蛋白酶原避免了补加甲醇带来的危害,且操作方便,大大缩短了周期,提高了生产效率,避免了动物源性污染.

关键词

毕赤酵母X33/重组猪胰蛋白酶原/重组猪胰蛋白酶/酵母表达

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出版年

2020
生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
浏览量2
被引量2
参考文献量11
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