摘要
目的:揭示miR-424-5P及NAcht富含亮氨酸重复蛋白1(NLRP1)在非小细胞肺癌细胞系增殖迁移和侵袭过程的作用机制.方法:利用qRT-PCR检测来自医院的15名非小细胞肺癌患者肿瘤组织和癌旁组织中NLRP1的mRNA水平;通过qRT-PCR检测2种非小细胞肺癌细胞HCC827、A549和正常肺上皮细胞BEAS-2B中NLRP1的mRNA水平;利用CCK-8检测下调表达NLRP1对A549细胞增殖能力的影响,Transwell检测下调表达NLRP1对A549细胞迁移和侵袭的影响;通过Targetscan软件预测,miR-424-5p是NLRP1的调控miRNA之一,将检测细胞分为miR-NC组、miR-424-5p mimics组及miR-424-5p inhibitor组,利用qRT-PCR检测3组细胞中miR-424-5p及NLRP1的mRNA水平,Western印迹检测NLRP1蛋白表达水平,双萤光素酶报告基因实验检测miR-424-5p与NLRP1之间靶向调控关系;将肺癌细胞A549分为miR-NC组、miR-424-5p inhibitor组及miR-424-5p inhibitor+si-NLRP1组,利用CCK-8法检测3组细胞的增殖能力,Transwell检测3组细胞的迁移和侵袭能力.结果:非小细胞肺癌患者肿瘤组织中NLRP1表达量明显高于癌旁组织;A549细胞中NLRP1表达量最高(P<0.01),而BEAS-2B中NLRP1表达量最低(P=0.157);下调表达NLRP1抑制A549细胞增殖迁移和侵袭能力;过表达miR-424-5p的A549细胞中NLRP1蛋白表达量降低(P<0.01),而敲低miR-424-5p增加NLRP1的蛋白表达(P<0.01);双萤光素酶报告基因实验验证miR-424-5p能与NLRP1的3'非翻译区结合抑制其表达(P<0.01);敲低miR-424-5p能够促进A549细胞的增殖迁移和侵袭能力(P<0.01),同时敲低miR-424-5p和NLRP1的表达量则可以使A549细胞的增殖迁移和侵袭能力降低到miR-NC的水平.结论:miR-424-5p能够靶向NLRP1抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖迁移和侵袭能力.
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