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新型冠状病毒N蛋白优势表位区段抗原的克隆表达及其诊断价值初步评价

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目的:制备高活性新型冠状病毒N蛋白的优势表位区段抗原,并初步评价该抗原在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值.方法:利用生物学软件分析N蛋白的B细胞表位分布,选取含有优势表位的抗原区段,然后用分子生物学技术进行克隆表达获得纯化抗原,ELISA初步评价该优势表位区段抗原的检测性能.结果:经过分析筛选确定15～215 aa为优势表位抗原区段,并获得了高效表达抗原.经过Biocore结合实验,确定优势表位区段抗原NP15-215可以与新型冠状病毒肺炎患者血清样本发生特异性抗原抗体反应.基于该抗原建立的IgM和IgG间接ELISA方法,对临床样本的检测灵敏度分别为60.87％、95.65％,特异性分别为90％、100％.NP-IgM检测的AUC值为0.797,NP-IgG检测的AUC值为0.998.结论:优势表位区段抗原NP15-215可用于NP抗体检测,利用该抗原建立的NP-IgM/IgG间接ELISA检测方法可以很好地区分新型冠状病毒肺炎患者和健康者.
Cloning and Expression of the Predominant Epitope Seg-ment Antigen of the New Coronavirus N Protein and Pre-liminary Evaluation of its Diagnostic Value

王坤、张玲、王超男、陈远哲、范占科、李垚、刘念、冯晓燕、付强、张贺秋

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滨州医学院,山东 烟台 264003

东方海洋(北京)医学研究院,北京 100071

新型冠状病毒 N蛋白 优势表位区段抗原 诊断

科技助力经济2020重点专项

SQ2020YFF0417553

2020

10.3969/j.issn.1009-0002.2020.06.007

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(6)
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