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小鼠原代肝细胞糖异生研究模型的建立

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目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型.方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞的葡萄糖产出水平、糖代谢关键酶基因表达水平,以及cAMP-PKA信号通路的激活情况,建立小鼠原代肝细胞糖异生研究模型.结果:分离的小鼠原代肝细胞具有典型的肝细胞形态,可见双核,细胞相互接触,排列成肝索样结构.在胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞糖异生葡萄糖产出量显著增加,小鼠原代肝细胞糖异生关键酶基因表达明显上调,且胰高血糖素能够促进细胞cAMP积累进而诱导PKA激活.结论:小鼠原代肝细胞分离后状态良好,能够在葡萄糖产出水平及细胞内信号通路激活上高效模拟哺乳动物机体糖异生代谢,是一项体外研究糖异生代谢的有效模型.
Establishment of Research Model of Mouse Primary Hepato-cyte Gluconeogenesis

李辉龙、万禄明、杨欢、彭雨蒙、王化鹏、韦猛、莫运海、徐艺心、魏从文、钟辉、吴飞翔

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广西医科大学附属肿瘤医院 肝胆外科,广西 南宁 530021

军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071

空军军医大学 基础医学院,陕西 西安 710032

广西肝癌诊疗工程技术研究中心,广西 南宁 530021

区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室,广西 南宁 530021

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小鼠原代肝细胞分离 糖异生细胞模型 胰高血糖素

国家自然科学基金国家自然科学基金国家自然科学基金地区基金区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室

820705958177320581860502GKE2019-06GKE-ZZ202004

2020

10.3969/j.issn.1009-0002.2020.06.013

生物技术通讯
军事医学科学院生物工程研究所

生物技术通讯

CSTPCD
影响因子：0.385
ISSN：1009-0002
年,卷(期)：2020.31(6)
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