为探究糖酵解途径关键基因干扰对其他肉品质功能基因的影响,先采用脂质体转染技术向分离、培养的肌肉卫星细胞中转染siRNA,干扰4个糖酵解途径关键基因(PKM、PFKM、PGK1、AL-DOA)的表达,再利用经诱导分化的肌肉卫星细胞进行RNA提取和反转录,并使用qPCR方法检测4个目的基因及15个肉品质功能基因的m RN A表达情况.结果表明,与对照组相比,转染组细胞在增殖特点和表型上没有明显差异,转染组4个目的基因的表达量下降33.5％ ～93.8％.P K M干扰后,7个肉品质功能基因表达显著下调,5个显著上调;PFKM和PGK1干扰后,12个肉品质功能基因表达显著下调,3个显著上调;A LDOA干扰后,8个肉品质功能基因表达显著下调,3个上调.在4个转染组中,L D H A、A COX1、PN PL A、CA PN1基因的表达水平均发生显著下降,而I-FA B P、POMC、DGA T1基因的表达水平上调最明显,相关基因主要涉及细胞能量代谢、糖脂代谢以及细胞组织结构形成通路,其中脂质代谢和能量调节通路基因在目的基因干扰下受到的影响最大.研究结果为在基因水平探究肉品质形成的内在调控机制提供了参考.
SiRNA interference of 4 glycolysis pathway genes and the silencing effects in muscle satellite cells
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