通过保守序列比对、cDNA末端快速扩增技术和融合引物巢式PCR技术克隆菌核侧耳(Pleurotus tuber-regium)钙调蛋白(calmodulin,CaM)基因Pt-CaM.基因全长856 bp,cDNA全长477 bp,编码 158个氨基酸.构建Pt-CaM的过表达和干涉载体,利用根癌农杆菌转化技术成功转化至菌核侧耳菌丝体中.在38℃高温培养下,过表达转化子的菌丝较野生型更致密,热激蛋白(heat shock protein)HSP70的表达量为野生型的3.89倍,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性为野生型的2.49倍和1.83倍;与野生型相比,干涉转化子菌丝生长速率降低,热胁迫损伤加重,其HSP70的表达量为野生型的0.77,SOD和CAT的活性无差别,过氧化物酶(peroxidase,POD)的活性为野生型的0.7.结果表明Pt-CaM可能通过影响HSP70的表达量和SOD、CAT和POD的活性参与菌核侧耳菌丝的耐热性调控.
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