摘要
目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在机械牵张致肺上皮细胞损伤中的作用.方法 体外培养小鼠肺上皮细胞MLE-12,传代至稳定后分别进行8％和20％应变率的机械牵张,频率0.5 Hz,牵张时间分别为0h,1h,2h,4h,采用Western blot法测定肺组织occludin蛋白的表达.之后再将MLE-12细胞随机分为3组:牵张组(C组)、二甲基亚砜对照组(D组)和PKC抑制剂BIM组(B组).牵张前1h使用PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I 5μmol/L(用二甲基亚砜溶解)处理细胞,采用20％的强度牵张0h,1h,2h,4h,频率0.5 Hz.采用Western blot法测定肺组织occludin蛋白的表达、显微镜下观察细胞生长状态.结果 Occludin蛋白在MLE-12细胞上表达明显,occludin蛋白表达随着牵张强度和时间的增加而减少,20％的强度、牵张4 h occludin蛋白表达明显下降;与C组比较,D组occludin蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),B组机械牵张4h时occludin蛋白表达上调(P＜0.05).同时,显微镜下显示:与C组比较,D组细胞损伤较明显,B组细胞损伤程度明显减轻.结论 蛋白激酶C参与机械牵张致肺上皮细胞损伤.
基金项目
国家自然科学基金面上项目(81770076)
山东第一医科大学学术提升计划(2019QL015)
山东第一医科大学学术提升计划(2019RC012)
山东省医药卫生科技发展计划项目(2019WS506)
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