目的:探索醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase,ADH,EC1.1.1.1)在植物乳酸杆菌中的基因克隆.方法:通过引物设计、酶的基因克隆、诱导表达三个部分来进行醇脱氢酶的基因克隆工作.结果:1.通过在GeneBank中搜索相关醇脱氢酶基因,共计429条,利用Vector NTI软件进行同源比较,选取其中4条作为简并引物设计基因来源,设计一对简并引物.2.以植物乳酸杆菌Lactobacillus plantarum DNA为模板,PCR扩增出其中的醇脱氢酶基因ADH,分别构建表达质粒Pet-22b和Pet-28a,经IPTG诱导及SDS-PAGE电泳验证,表明在大肠杆菌DH5α中存在特异性条带,且大小相符.
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