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阳春砂ISSR-PCR反应体系的建立和优化

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目的 建立起适合阳春砂的ISSR-PCR反应体系.方法 综合运用单因素实验和L9(34)正交实验两种方法,对DNA模板、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶等因素进行优化,以及采用温度梯度筛选引物的退火温度.结果 最终获得的阳春砂的最优ISSR-PCR体系为:总体积为20 μl,其中包括10×Ex Taq Buffer(含15 mmol·L-1 Mg2+)2 μl,25 ng DNA模板,0.50 μmol·L-1引物,0.75 mmol·L-1 dNTPs和1.0 U Ex Taq酶.通过温度梯度筛选出引物UBC808的最佳退火温度为52.0 ℃.结论 这一优化体系为阳春砂的ISSR分析奠定了基础.
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Amomum villosum Lour

黄琼林、杨锦芬、严萍、詹若挺、徐晖、陈蔚文

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广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心,中药资源科学教育部重点实验室,广东,广州,510006

阳春砂 ISSR-PCR反应体系 单因素实验 正交实验 温度梯度

国家"十一五"科技支撑计划子课题国家中药材扶持资金项目广东省高等学校学科建设专项

2006BAI09B01-06[2007]1055[2008]36

2010

10.3969/j.issn.1008-0805.2010.10.026

时珍国医国药
时珍国医国药杂志社

时珍国医国药

CSCD北大核心
影响因子：0.887
ISSN：1008-0805
年,卷(期)：2010.21(10)
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