首页|云南沉香ISSR-PCR反应体系的建立与优化

云南沉香ISSR-PCR反应体系的建立与优化

扫码查看
原文链接
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
  • 维普
目的 建立并优化出清晰稳定的云南沉香ISSR-PCR反应体系和扩增程序,并筛选出适合的引物.方法 利用正交设计试验,对云南沉香ISSR-PCR反应体系中的5个主要因素进行优化,并设置温度梯度检测最佳退火温度.结果 首次建立了云南沉香ISSR-PCR的最佳反应体系,即在20μl反应体系中,各个因素的浓度分别为:模板DNA 10 ng/20μl、Mg2+ 3mmol/L、Taq DNA聚合酶2.4 U/20μl、dNTP 0.6mmol/L、引物0.2μmol/L;引物UBC811的最佳退火温度为53.0℃.并且,从100条引物中筛选出16条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.结论 优化确立的云南沉香ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可为后续云南沉香的遗传多样性分析研究奠定基础.

林丹、张宏意、刘晓琳、何梦玲、严寒静

展开 >

广东药科大学中药学院,广东广州510006

国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室,广东广州510006

云南沉香 ISSR-PCR 体系优化 正交设计 引物筛选

广东省科技厅科研项目

2015A030302087

2018

10.3969/j.issn.1008-0805.2018.02.064

时珍国医国药
时珍国医国药杂志社

时珍国医国药

CSCD北大核心
影响因子：0.887
ISSN：1008-0805
年,卷(期)：2018.29(2)
  • 3
  • 13