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肾衰饮对肾间质纤维化大鼠miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径的作用及影响

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目的 以miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径为切入点，探讨肾衰饮改善肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法 将60只雄性SD大鼠适应性喂养3d后，按体重随机分为两组，即假手术组10只，模型组50只，采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型。造模成功后，将大鼠再随机分为组:模型组，肾衰饮低剂量组，肾衰饮中剂量组，肾衰饮高剂量组及尿毒清组。分别按人与大鼠1∶1/2，1∶1，1∶2和1∶1灌胃各给药组大鼠，假手术组与模型组给予生理盐水0。15ml/10g灌胃，M组:9。56 g/kg/d。实验期间进行一般情况观察，灌胃治疗14d后结束实验，各组大鼠禁食、不禁水12h，第二日早8:00称重，进行取材。收集24小时尿，全自动生化分析仪一次性检测尿肌酐(UCr)、微球蛋白(β2-MG)及尿微量白蛋白(mAlb)含量，髂总动脉分支处穿刺采血测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变及胶原沉积情况;免疫组织化学法检测肾脏组织相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾脏组织miRNA21及相关mRNA的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测肾脏组织相关蛋白表达水平。结果 与假手术组大鼠比较，模型组大鼠精神倦怠，明显消瘦，排便、排尿异常。Scr、BUN、Ucr、β2-MG、mAlb显著升高(P＜0。01)。模型组HE染色肾组织结构紊乱，肾小管官腔明显扩张，排列稀疏，肾小管间质明显增宽，间质内有炎性细胞浸润;Masson模型组肾间质区及系膜区增宽伴大量胶原纤维沉积;肾脏组织miR-21、p62、FN、Collagen Ⅲ mRNA的表达显著增高(P＜0。01或P＜0。05)，PTEN、Atgl3、LC3、Beclin-1mRNA的表达显著降低(P＜0。01或P＜0。05);肾脏组织 FN、Collagen Ⅲ、p62、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR 蛋白水平显著增高(P＜0。01);PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1蛋白水平显著降低(P＜0。01或P＜0。05)。经给药治疗后，各给药组大鼠上述指标均明显好转(P＜0。01或P＜0。05)，其中以肾衰饮高剂量组最为显著，明显优于尿毒清组(P＜0。01或P＜0。05)。结论 肾衰饮可能通过下调miR-21及其介导的PTEN/AKT/m TOR通路，从而促进自噬的发生而有效延缓肾间质纤维化的发生发展。

刘烨、任艳玲、王柏山、郭玲、李志明

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辽宁中医药大学,辽宁沈阳 110032

辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳 110032

肾衰饮 肾间质纤维化 miRNA-21 自噬途径

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816739562021JH2/103000341202030XLYC2005006

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10.3969/j.issn.1008-0805.2024.02.17

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