摘要
目的 构建变应性鼻炎(AR)脾虚湿困证病证结合大鼠模型,并对模型质量进行评价.方法 24只SD大鼠随机分为3组,包括空白组、变应性鼻炎组(AR组)、脾虚湿困变应性鼻炎组(PAR组),每组8只.空白组仅予常规饲养,AR组通过"卵清白蛋白(OVA)氢氧化铝混悬液腹腔注射+OVA生理盐水溶液局部滴鼻激发"构建AR模型,PAR组除施加AR组造模方法外,另外采用"恒温恒湿箱饲养+冷番泻叶水浸液、猪油灌胃+隔日禁食"的多因素复合方法建立AR脾虚湿困证模型.观察各组大鼠的一般情况和鼻部症状;测量脾指数、腹围指数;进行强迫游泳实验(FST)和旷场实验(OFT);ELISA法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)水平;全自动生化分析仪测定血脂指标;HE染色观察鼻黏膜、肝与结肠组织的病理学改变;Western Blot法检测鼻黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)、水通道蛋白5(AQP5)、AQP8的表达.结果 与空白组和AR组比较,PAR组在证候学上出现AR脾虚湿困证的症状与体征,擦鼻、喷嚏、流涕症状更显著,体质量增长缓慢,腹围指数、脾指数均显著升高(P<0.05);在行为学实验中表现出明显脾虚证状态;在分子生物学指标上表现为血清IgE、MTL、GAS、TG、TC、LDL的水平明显升高(P<0.05),鼻黏膜组织的AQP5、AQP8、NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05).HE染色显示,AR组和PAR组的鼻黏膜受损,纤毛脱落,伴大量炎性浸润,PAR组出现肝脂肪样变及结肠炎性改变.结论 采用"恒温恒湿箱饲养+冷番泻叶水浸液、猪油灌胃+隔日禁食+OVA氢氧化铝混悬液腹腔注射+OVA生理盐水溶液局部滴鼻激发"的多因素复合造模法可成功构建贴合临床发病机制与致病特点的AR脾虚湿困证病证结合大鼠模型,此构建方法与验证体系可为AR的中医证候研究提供可靠模型.
基金项目
国家自然科学基金(82274591)
国家中医药局中医药人才培养重点学科建设项目(0102023701)
广东省广州市科技局市校(院)联合基础与应用基础研究项目(202201020473)
广东省中医药局科研项目中医湿证国家重点实验室建设专项(2022KT1278)
广东省教育厅青年创新人才类项目(20225018)