基于B7-1/2/CD28/CTLA-4通路探讨扶正祛毒汤干预急性髓系白血病完全缓解患者CD34+细胞诱导成树突细胞激发T细胞的影响

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中文摘要：目的探讨扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的可能作用机制。方法 12只新西兰大白兔随机分为正常组以及扶正祛毒汤低、中、高剂量组，每组3只。扶正祛毒汤低、中、高剂量组兔分别给予扶正祛毒汤浓缩煎剂5、10、20g/(kg·d)灌胃3d，正常组兔给予等体积蒸馏水灌胃，末次灌胃后心脏取血获得正常血清和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清。将急性髓系白血病完全缓解患者骨髓稀释后分离提纯CD34+细胞，将扩增后的CD34+细胞分为空白组、细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组。除空白组外，其余各组均添加细胞因子诱导9d成为树突细胞。流式细胞术(FCM)检测各组树突细胞表面抗原分子CD83、CDla、HLA-DR的表达，以及共刺激分子B7-1、B7-2的表达。诱导成熟后的树突细胞分别激发自体和异体T细胞，免疫印迹试验(WB)和RT-qPCR法检测T细胞中特异性表面糖蛋白CD28(CD28)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)蛋白和mRNA的表达。MTT比色法检测激发后的T细胞在不同效靶比时对人髓系白血病细胞株K562的杀伤作用。结果与空白组相比较，细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1 a、HLA-DR的表达明显升高(P＜0。05)，共刺激分子B7-1、B7-2的表达明显升高(P＜0。05);与细胞因子组和正常血清组相比较，扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达明显升高(P＜0。05)，共刺激分子B7-1、B7-2的表达明显升高(P＜0。05)。与空白组、细胞因子组和正常血清组相比较，扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组CD28蛋白及mRNA表达均明显增加(P＜0。05)，CTLA-4蛋白及mRNA表达均明显降低(P＜0。05)，T细胞对K562细胞的杀伤率明显增加(P＜0。05)，且杀伤作用随效靶比的增加而增强，但正常人T细胞与患者T细胞对K562细胞的杀伤作用无明显差异(P＞0。05)。结论扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的机制可能与该方能够有效促进急性髓系白血病完全缓解患者骨髓CD34+细胞源树突细胞的成熟，从而抑制共刺激分子B7-1、B7-2与CTLA-4结合，且促进B7-1、B7-2与CD28结合，调控B7-1/2/CD28/CTLA-4信号通路有关。

作者：

彭名行、黄礼明、朱国庆、张常芬、尹尚瑾、左乐、陈孟豪

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作者单位：

贵州中医药大学,贵州贵阳 550025

贵州中医药大学第二附属医院,贵州贵阳 550003

关键词：

急性髓系白血病完全缓解扶正祛毒汤 B7-1/2/CD28/CTLA-4信号通路树突细胞 T细胞 K562细胞

出版年：

2024

DOI：

10.3969/j.issn.1008-0805.2024.03.36