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基于腺苷A3受体活化调控MAPK/ERK信号通路探究针刀疗法治疗兔膝骨关节炎的分子机制

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目的 基于腺苷A3受体(adenosine A3 receptor，A3R)活化调控MAPK/ERK信号通路探究针刀疗法对兔膝骨关节炎的影响及其分子机制。方法 行膝关节腔灌注2％木瓜蛋白酶溶液加膝关节强迫屈曲位法构建KOA模型。50只体质量相近的新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、针刀组、针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK激活剂组，共5组，每组10只大兔(5只雄性、5只雌性)。针刀组行针刀疗法治疗，每周1次，持续4周。针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK激活剂组:在行针刀疗法的同时，分别经耳缘静脉注射A3R拮抗剂MRS1220和MAPK/ERK信号通路激活剂LM22B-10，每周1次，持续4周。干预完成后对各组大兔行行为学观察并评分;采用HE染色法观察右膝关节软骨组织形态变化;采用ELISA法检测右膝关节软骨组织TNF-α、IL-1β、MMP-3水平变化;采用Western Blot法检测右膝关节软骨组织A3R、ERK、p-ERK的蛋白水平;采用Real-time PCR法检测右膝关节软骨组织A3R、ERK1、ERK2的基因表达水平。结果 干预完成后，与空白组相比，模型组右膝关节软骨组织损伤严重，Lequesne MG评分均显著上升(P＜0。01)，TNF-α、IL-1β、MMP-3含量显著上升(P＜0。01)，A3R蛋白显著减少(P＜0。01)，p-ERK蛋白显著增加(P＜0。01)，A3R基因表达显著下调(P＜0。01);与模型组相比，针刀组、针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK阻断剂组以上指标皆逆转(P＜0。05);与针刀组相比，针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK阻断剂组右膝关节软骨组织损伤改善程度较低，Le-quesne MG 评分均上升(P＜0。05)，TNF-α、IL-1β、MMP-3 含量上升(P＜0。05)，A3R 蛋白减少(P＜0。05)，p-ERK 蛋白增加(P＜0。05)，A3R基因表达下调(P＜0。05)。5组间ERK蛋白水平差异、ERK1/2基因表达差异无统计学意义(P＞0。05)。结论 针刀疗法可明显改善KOA大兔膝关节活动功能，降低相关炎性因子的含量，其作用机制可能与通过其产生的力学效应活化膝关节软骨组织中的A3R从而降低膝关节内致炎因子IL-1β、TNF-α水平和抑制MAPK/ERK信号通路中ERK的磷酸化以降低软骨组织中MMP-3的含量相关。

王飞、贺琳钦、李鹏飞、李小冬、陈启鹏、张奇、宋寒冰

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黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江哈尔滨 150040

膝骨关节炎 针刀疗法 力学效应 腺苷A3受体 MAPK/ERK信号通路

黑龙江省自然科学基金优秀青年基金黑龙江中医药大学研究生创新科研项目

YQ2020H0282023yjscx041

2024

10.3969/j.issn.1008-0805.2024.04.65

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影响因子：0.887
ISSN：1008-0805
年,卷(期)：2024.35(4)
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