目的 基于腺苷A3受体(adenosine A3 receptor,A3R)活化调控MAPK/ERK信号通路探究针刀疗法对兔膝骨关节炎的影响及其分子机制.方法 行膝关节腔灌注2％木瓜蛋白酶溶液加膝关节强迫屈曲位法构建KOA模型.50只体质量相近的新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、针刀组、针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK激活剂组,共5组,每组10只大兔(5只雄性、5只雌性).针刀组行针刀疗法治疗,每周1次,持续4周.针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK激活剂组:在行针刀疗法的同时,分别经耳缘静脉注射A3R拮抗剂MRS1220和MAPK/ERK信号通路激活剂LM22B-10,每周1次,持续4周.干预完成后对各组大兔行行为学观察并评分;采用HE染色法观察右膝关节软骨组织形态变化;采用ELISA法检测右膝关节软骨组织TNF-α、IL-1β、MMP-3水平变化;采用Western Blot法检测右膝关节软骨组织A3R、ERK、p-ERK的蛋白水平;采用Real-time PCR法检测右膝关节软骨组织A3R、ERK1、ERK2的基因表达水平.结果 干预完成后,与空白组相比,模型组右膝关节软骨组织损伤严重,Lequesne MG评分均显著上升(P＜0.01),TNF-α、IL-1β、MMP-3含量显著上升(P＜0.01),A3R蛋白显著减少(P＜0.01),p-ERK蛋白显著增加(P＜0.01),A3R基因表达显著下调(P＜0.01);与模型组相比,针刀组、针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK阻断剂组以上指标皆逆转(P＜0.05);与针刀组相比,针刀联合A3R拮抗剂组、针刀联合ERK阻断剂组右膝关节软骨组织损伤改善程度较低,Le-quesne MG 评分均上升(P＜0.05),TNF-α、IL-1β、MMP-3 含量上升(P＜0.05),A3R 蛋白减少(P＜0.05),p-ERK 蛋白增加(P＜0.05),A3R基因表达下调(P＜0.05).5组间ERK蛋白水平差异、ERK1/2基因表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 针刀疗法可明显改善KOA大兔膝关节活动功能,降低相关炎性因子的含量,其作用机制可能与通过其产生的力学效应活化膝关节软骨组织中的A3R从而降低膝关节内致炎因子IL-1β、TNF-α水平和抑制MAPK/ERK信号通路中ERK的磷酸化以降低软骨组织中MMP-3的含量相关.
NETL
NSTL
万方数据
