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基于TLR4/NF-κB信号通路探讨祛脂愈肝汤对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

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目的 探讨祛脂愈肝汤含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 制备祛脂愈肝汤含药血清，通过抵抗素诱导HSC-T6细胞建立非酒精性脂肪性肝纤维化模型，设置空白组、模型组、祛脂愈肝汤含药血清低、中、高剂量组及吡格列酮组，采用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测各组细胞增殖情况，油红O染色观察脂质沉积程度，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、IκB磷酸化激酶(IKK alpha/beta)的蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组细胞表现为激活型状态，细胞内蓄积有大量橘红色脂滴，细胞增殖率升高(P＜0。05)，细胞上清液IL-1β、1L-6、TNF-α含量显著升高(P＜0。01)，TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、NF-κB和IKK的蛋白表达水平均显著增高(P＜0。01)。与模型组比较，各药物组细胞生长被抑制，细胞内脂滴减少，均可抑制细胞增殖(P＜0。05)，并能促进细胞凋亡(P＜0。05)，相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达均明显降低(P＜0。01)，TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、IKK和NF-κB的蛋白表达水平均显著下调(P＜0。01)。结论 祛脂愈肝汤能通过调控TLR4/NF-κB信号通路，抑制细胞增殖活化，促进凋亡，减少相关炎症因子释放，从而达到有效治疗NAFLD肝纤维化的作用。

石思、李开楊、赵琦、胡奕、吴小梅、汪倩、杨梅

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贵州中医药大学,贵州贵阳 550005

贵州中医药大学第二附属医院,贵州贵阳 550003

祛脂愈肝汤 非酒精性脂肪性肝纤维化 肝星状细胞 TLR4/NF-κB信号通路 细胞增殖/凋亡

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82160866黔科合基础-ZK[2023]一般433gzwkj2023-208YJSKYJJ[2021]168黔教技[2023]017号

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