时珍国医国药2024,Vol.35Issue(5) :1063-1067.DOI:10.3969/j.issn.1008-0805.2024.05.09

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨祛脂愈肝汤对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

石思 李开楊 赵琦 胡奕 吴小梅 汪倩 杨梅
时珍国医国药2024,Vol.35Issue(5) :1063-1067.DOI:10.3969/j.issn.1008-0805.2024.05.09

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨祛脂愈肝汤对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

石思 1李开楊 1赵琦 2胡奕 1吴小梅 1汪倩 1杨梅2
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作者信息

  • 1. 贵州中医药大学,贵州贵阳 550005
  • 2. 贵州中医药大学第二附属医院,贵州贵阳 550003
  • 折叠

摘要

目的 探讨祛脂愈肝汤含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及TLR4/NF-κB信号通路的影响.方法 制备祛脂愈肝汤含药血清,通过抵抗素诱导HSC-T6细胞建立非酒精性脂肪性肝纤维化模型,设置空白组、模型组、祛脂愈肝汤含药血清低、中、高剂量组及吡格列酮组,采用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,油红O染色观察脂质沉积程度,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、IκB磷酸化激酶(IKK alpha/beta)的蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组细胞表现为激活型状态,细胞内蓄积有大量橘红色脂滴,细胞增殖率升高(P<0.05),细胞上清液IL-1β、1L-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、NF-κB和IKK的蛋白表达水平均显著增高(P<0.01).与模型组比较,各药物组细胞生长被抑制,细胞内脂滴减少,均可抑制细胞增殖(P<0.05),并能促进细胞凋亡(P<0.05),相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达均明显降低(P<0.01),TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、IKK和NF-κB的蛋白表达水平均显著下调(P<0.01).结论 祛脂愈肝汤能通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制细胞增殖活化,促进凋亡,减少相关炎症因子释放,从而达到有效治疗NAFLD肝纤维化的作用.

关键词

祛脂愈肝汤/非酒精性脂肪性肝纤维化/肝星状细胞/TLR4/NF-κB信号通路/细胞增殖/凋亡

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基金项目

国家自然科学基金(82160866)

贵州省科技计划项目(黔科合基础-ZK[2023]一般433)

贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2023-208)

贵州中医药大学大学生创新创业项目(YJSKYJJ[2021]168)

贵州省高等学校重点实验室(黔教技[2023]017号)

出版年

2024
时珍国医国药
时珍国医国药杂志社

时珍国医国药

北大核心
影响因子:0.887
ISSN:1008-0805
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