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基于AGEs-RAGE轴探讨左归丸有效成分对衰老骨髓间充质干细胞的影响

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目的 观察左归丸中有效成分马钱苷、山奈酚对衰老骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响，并基于AGEs-RAGE轴进一步探讨其作用机制。方法 原代培养大鼠BMSCs，采用免疫荧光染色鉴定细胞表面标记物;MTT重复实验观察马钱苷、山奈酚对BMSCs增殖影响并确定最佳用药时间及浓度;D-半乳糖(D-gal)诱导建立衰老BMSCs模型，采用B-半乳糖苷酶染色确定最佳造模浓度并分别观察低、中、高浓度马钱苷、山奈酚对衰老BMSCs数目的影响;取P3代细胞，随机分为空白对照组、D-gal衰老造模组、D-gal+马钱苷组、D-gal+山奈酚组，采用Real-time荧光定量PCR检测衰老相关分泌表型(SASP，选取IL-6、HMGB1、GATA-4、TRAF3IP2)及衰老相关分子(p16、p21、p53)mRNA 表达，Western blot法检测RAGE、Glo1、NF-κB蛋白表达;ELISA法检测AGEs含量及Glo1活性。结果 实验浓度的马钱苷和山奈酚在24h和48h均有促进BMSCs增殖的作用，且与衰老造模组比较，低、中、高浓度的马钱苷和山奈酚都能不同程度地减少衰老BMSCs数目。与空白对照组比较，D-gal衰老造模组的IL-6、p53、p21、p16 mRNA表达都显著增高(P＜0。001，P＜0。01，P＜0。01，P＜0。05);与D-gal衰老造模组相比，马钱苷能明显降低IL-6、GATA-4 mRNA表达(P＜0。001，P＜0。05)，山奈酚则能显著降低IL-6、TRAF3IP2和p21 mRNA表达(P＜0。001，P＜0。01，P＜0。05)。与空白对照组比较，D-gal衰老造模组AGEs含量明显升高(P＜0。001)，Glo1活性显著降低(P＜0。001)，RAGE、NF-κB蛋白表达有升高的趋势;与D-gal衰老造模组比较，山奈酚能显著降低RAGE蛋白表达(P＜0。05)，马钱苷和山奈酚均能明显上调Glo1 的活性(P＜0。001)、降低 NF-κB 蛋白表达(P＜0。05，P＜0。01)及 AGEs 含量(P＜0。01，P＜0。001)。结论 左归丸中有效成分马钱苷、山奈酚均能促进BMSCs增殖，减少SASP和衰老相关分子的表达从而延缓BMSCs衰老，其机制可能与调节AGEs-RAGE轴及其下游分子表达有关。

梁超、杨暑晨、许言午、龚张斌、胡海燕、张学礼、康湘萍

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上海中医药大学中医学院,上海 201203

上海中医药大学中西医结合学院,上海 201203

左归丸 马钱苷 山奈酚 骨髓间充质干细胞 衰老

国家自然科学基金国家自然科学基金

8180398782174102

2024

10.3969/j.issn.1008-0805.2024.05.15

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影响因子：0.887
ISSN：1008-0805
年,卷(期)：2024.35(5)