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基于Nrf2/HO-1/HIF-1α通路探讨升降散对EAE鼠巨噬细胞的调控作用

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目的 为探讨升降散(SJP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)鼠巨噬细胞的调控作用，并进一步揭示其作用的靶点。方法 将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组(CON)、模型组(MOD)、升降散低剂量组(SJP-L)、升降散高剂量组(SJP-H)和醋酸泼尼松组(PAT)。除正常组以外，余下组别小鼠均构建EAE模型。通过行为学评分、体重变化和组织HE染色病理学评分评估药物疗效。采用免疫组织化学染色法测定CD86和CD206的表达，通过蛋白质免疫印迹法检测脊髓核因子E2相关因子2(Nuclear factor-E2-related factor2，Nrf2)，血红素加氧酶 1(Heme oxygenase-1，HO-1)，超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)，缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-in-ducible factor-1α，HIF-1α)的表达水平。结果 与MOD相比，SJP各剂量组和PAT组显著缓解了 EAE小鼠神经功能的缺损(P＜0。05或P＜0。01)，减轻了中枢神经系统的炎症浸润(P＜0。01或P＜0。001);与CON组相比，MOD组的CD86表达明显升高(P＜0。001)，CD206的表达明显降低(P＜0。001)，与MOD组相比，SJP组抑制了 CD86的表达(P＜0。01或P＜0。001)，上调了 CD206的表达(P＜0。001);与CON组相比，MOD组Nrf2、HO-1和SOD-1蛋白显示出下调趋势(P＜0。05，P＜0。01 或P＜0。001)，而 HIF-1α 被上调(P＜0。01)，SJP 干预后上调了 Nrf2、HO-1 和 SOD-1 的水平(P＜0。01)，抑制了 HIF-1α的表达(P＜0。01)。结论 升降散能通过调节巨噬细胞M1/M2的免疫平衡改善EAE鼠的临床症状，并减轻病灶的炎症浸润。同时高剂量升降散对Nrf2/HO-1/HIF-1α通路的活化具有一定的调节作用。

吴璐璐、郑泽泉、赵敏、吴智兵、招远祺、许浩游

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广州中医药大学第二临床医学院,广东广州 510405

广州中医药大学第二附属医院,广东广州 510400

广州中医药大学第一附属医院,广东广州 510403

升降散 实验性自身免疫性脑脊髓炎 Nrf2/HO-1/HIF-1α通路 升清降浊法 M1/M2免疫平衡

广东省中医药局科研项目广东省基础与应用基础研究基金项目

202211662022A1515220134

2024

10.3969/j.issn.1008-0805.2024.05.21

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