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"秩边透水道"针法对卵巢低反应小鼠Notch1/Hes1/JAG1信号通路的影响

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目的 通过观察针刺对卵巢低反应(poor ovarian response,POR)小鼠卵巢组织神经源性基因Notch同源蛋白1(notch receptor 1,Notch1)/Hes 家族 BHLH 转录因子 1(hes family bHLH transcription factor 1,Hes1)/锯齿状典型 Notch 配体1(Anti-JAG1 antibody-CD339,JAG1)通路的影响,探讨"秩边透水道"针法治疗POR的可能机制。方法 筛选动情周期正常的36只小鼠,按随机数字表分为空白组、模型组、针刺组;模型组和针刺组连续14天给予雷公藤混悬液灌胃以制备POR小鼠模型,空白组采用生理盐水等剂量灌胃,造模完成后针刺组取"秩边透水道"针刺治疗,每日1次,每次20 min,连续治疗14 d,随后三组同时促排,次日取材检测相应指标。阴道涂片法观测小鼠动情周期变化;比较各组小鼠卵巢指数;ELISA法检测小鼠血清中抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hor-mone,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)、促黄体生成激素(luteinizing hormone,LH)的含量;HE染色法检测卵巢形态;TUNEL染色观察卵巢颗粒细胞凋亡情况;荧光定量PCR法和Western blot法测Notch1、Hes1、JAG1、BCL-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X,BAX)、B淋巴细胞瘤-2(b-cell lymphoma-2,Bcl-2)mRNA和蛋白表达变化。结果 与空白组相比,模型组小鼠动情周期紊乱率升高(P<0。01);卵巢组织形态变差,闭锁卵泡增多;获卵数、卵巢湿重和卵巢指数不同程度降低(P<0。01);血清中AMH、E2含量下降,FSH、LH含量升高(P<0。01);卵巢细胞凋亡面积增加(P<0。01),卵巢组织Bax mRNA和蛋白表达水平升高(P<0。01),Notch1、Hes1、JAG1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0。01,P<0。05)。与模型组比较,针刺组小鼠动情周期紊乱率降低(P<0。01),卵巢组织形态得到改善,闭锁卵泡减少,获卵数、卵巢湿重升高(P<0。01),卵巢指数升高(P<0。05);血清中AMH、E2含量提高,FSH、LH含量下降(P<0。01);卵巢细胞凋亡面积减少(P<0。01);卵巢组织Bax蛋白表达水平降低(P<0。01),Notch1、Hes1、JAG1和Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平提高(P<0。01,P<0。05)。结论 "秩边透水道"针法可以改善POR小鼠卵巢反应低下,提高卵巢功能,其机制可能与调节Notch信号通路上的关键因子有关。

常博雅、任佳、金旭、高珍、曹玉霞、王海军

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山西中医药大学第二临床学院,山西晋中 030619

"秩边透水道" 针刺 卵巢低反应 Notch通路 凋亡

国家自然基金面上项目山西省教育厅科技项目山西中医药大学博士科研启动基金

820745492023L1872023BK17

2024

时珍国医国药
时珍国医国药杂志社

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北大核心
影响因子:0.887
ISSN:1008-0805
年,卷(期):2024.35(5)