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秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠抗血管新生作用及机制研究

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目的 探讨秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎(RA)模型大鼠的抗血管新生作用及其作用机制。方法 选取5～6周龄SPF级SD大鼠54只，雌雄各半。除空白组外，其余均采用Ⅱ型胶原诱导法复制胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型。将造模成功的48只大鼠按随机数表法分为模型组、阳性药(甲氨蝶呤)组、龙胆苦苷配伍木兰花碱组、龙胆苦苷配伍灵仙新苷组、獐牙菜苷配伍木兰花碱组、獐牙菜苷配伍灵仙新苷组、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱组、獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷组，每组6只，另设空白组，共计9组。造模后，各组分别给予相应药液或生理盐水灌胃，连续给药15天。实验中记录大鼠一般状态，酶联免疫吸附技术(ELISA)检测大鼠血清类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP Ab)、白细胞介素-1β(IL-1β)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠踝关节组织病理学变化;采用免疫组织化学法(IHC)检测大鼠踝关节血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白含量;同时检测CD34，半定量分析微血管密度(MVD)。蛋白免疫印迹(WB)法检测大鼠踝关节VEGF、VEGFR-2蛋白含量;实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)检测大鼠踝关节VEGF、VEGFR-2的基因表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠一般状态较差，足跖肿胀显著;血清Anti-CCP Ab、IL-1β的含量明显升高(P＜0。01，P＜0。05);踝关节组织结构破坏严重;踝关节VEGF、VEGFR-2蛋白及基因表达显著上调(P＜0。01);MVD显著上调(P＜0。01)。与模型组比较，各给药组大鼠一般状态、足跖肿胀度明显改善;血清RF、IL-1β、Anti-CCP Ab、Bcl-2的含量均不同程度降低，其中龙胆苦苷配伍木兰花碱组降低RF及Bcl-2、龙胆苦苷配伍灵仙新苷组降低IL-1β、獐牙菜苷配伍灵仙新苷组降低Anti-CCP Ab的效果优于其他组分配伍;踝关节组织病理变化均有不同程度改善;踝关节VEGF、VEGFR-2蛋白及基因表达显著下降(P＜0。01，P＜0。05)，其中獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷组作用最为显著;各给药组大鼠踝关节MVD明显降低(P＜0。01)。结论 秦艽、威灵仙组分配伍能明显缓解RA模型大鼠的症状，其作用机制可能是通过降低炎性因子分泌，降低微血管密度，抑制血管新生，抑制VEGF、VEGFR-2蛋白和基因的异常表达，从而发挥对RA的治疗作用。

王丽明、吴国泰、高慧琴、郭从嘉、郝倩莹

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甘肃中医药大学药学院,甘肃兰州 730000

中国人民解放军96604部队医院,甘肃兰州 730030

秦艽 威灵仙 组分配伍 类风湿关节炎 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体2 微血管密度

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81960725

2024

10.3969/j.issn.1008-0805.2024.07.07

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ISSN：1008-0805
年,卷(期)：2024.35(7)