摘要
目的 探讨毒结清口服液调控Sclerostin/Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠间充质干细胞(bone marrow mesenchy-mal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用机制.方法 提取、培养小鼠BMSCs,将BMSCs随机分为空白组、模型组、中药组(毒结清口服液组)、骨硬化蛋白单抗组、中药联合骨硬化蛋白组.CCK8法测定药物干预浓度及细胞增殖情况;流式表型鉴定BMSCs;扫描电镜观察BMSCs形态变化;骨碱性磷酸酶(ALP)活性检测、ALP染色及矿化结节染色评估BMSCs成骨分化程度;RT-qPCR 法检测 Wnt1、β-catenin、cyclin D1、PCNA、BMP-2 mRNA 表达情况;Western Blot 法检测 Wnt1、β-catenin、cyclin D1、PCNA、BMP-2表达情况.结果 与模型组比较,中药组对BMSCs成骨分化有促进作用(P＜0.05);与中药联合骨硬化蛋白组比较,中药组对骨硬化蛋白有拮抗作用(P＜0.05);与模型组比较,中药组Wnt1、β-catenin、cyclin D1、PCNA、BMP-2 mRNA 的表达(P＜0.05)及 Wnt1、β-catenin、cyclin D1、PCNA、BMP-2 的表达上调(P＜0.05).结论 毒结清口服液对BMSCs成骨分化有促进作用,其机制可能与毒结清口服液拮抗Sclerostin并激活Wnt/β-catenin信号通路的作用相关.
基金项目
国家自然科学基金地区基金(81960839)
广西壮族自治区研究生教育创新计划(YCSW2023386)
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