目的 探讨抗纤益心方通过调控SIRT1介导的线粒体自噬对心肌细胞肥大的影响及相关作用机制.方法 H9c2心肌细胞常规培养,去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)诱导H9c2建立心肌细胞肥大模型.将细胞分为正常组、模型组、抗纤益心方组、EX-527(SIRT1抑制剂)组、抗纤益心方+EX-527组.JC-1探针检测心肌细胞内线粒体膜电位水平;线粒体超氧化物荧光探针检测心肌细胞细胞ROS含量;Real-Time PCR测定心肌细胞中SIRT1、BNIP3、FUNDC1、ANP、BNP mRNA表达水平;Western Blot检测心肌细胞中SIRT1、BNIP3、FUNDC1、LC3蛋白表达水平.结果 与正常组相比,模型组线粒体膜电位降低(P＜0.05),ROS含量升高(P＜0.05),ANP、BNP mRNA表达水平升高(P＜0.01),SIRT1、BNIP3、FUNDC1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05),LC3蛋白表达无明显差异(P＞0.05);与模型组相比,抗纤益心方增加线粒体膜电位(P＜0.05),减少ROS含量(P＜0.05),降低ANP、BNP mRNA表达水平(P＜0.01),升高肥大心肌细胞中SIRT1、BNIP3、FUNDC1 mRNA及蛋白表达水平(P＜0.05),LC3蛋白表达无明显差异(P＞0.05);与抗纤益心方组相比,抗纤益心方+EX-527组心肌细胞中线粒体膜电位降低(P＜0.05),ROS含量增加(P＜0.05),ANP、BNP mRNA表达水平升高(P＜0.05),SIRT1、BNIP3、FUNDC1、LC3 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).结论 抗纤益心方抑制心肌细胞肥大的作用机制可能与激活SIRT1,上调线粒体自噬相关因子BNIP3、FUNDC1、LC3的表达有关.
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