首页|牙鲆细胞因子M17蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

牙鲆细胞因子M17蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

扫码查看
原文链接
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
  • 维普
M17是鱼类细胞因子IL-6亚族家族的成员之一,具有细胞因子样功能,在鱼体内发挥抗病毒和抗细菌的作用.为了制备牙鲆(Paralichthys olivaceus)M17 蛋白的多克隆抗体,将M17基因插入pET-32a原核表达载体,构建M17基因原核表达质粒pET-32a-M17.将构建的质粒pET-32a-M17转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)细胞,通过IPTG诱导M17蛋白表达,利用Ni-NTA亲和层析柱纯化M17重组蛋白.利用纯化的重组M17蛋白免疫小鼠获得M17多克隆抗体(抗血清).结果显示,IPTG诱导后M17蛋白分子质量大小约为50.0 ku,M17重组蛋白主要以包涵体表达为主;Ni-NTA亲和层析柱纯化后透析复性后M17重组蛋白浓度为597 μg·mL-1;多克隆抗体经双向琼脂免疫扩散法检测抗体效价为1∶16,经Western blotting分析可见单一目的条带,说明制备的多克隆抗体具有较强的特异性.综上可知,M17重组蛋白表达成功,且制备的抗M17多克隆抗体可用于M17蛋白的生物学功能研究.
Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation of M17 Protein in Flounder(Paralichthys olivaceus)

Paralichthys olivaceusM17 proteinprokaryotic expressionrecombinant proteinpolyclonal antibody

苏玉凤、马倩倩、孙敬锋

展开 >

天津农学院水产学院/天津市水产生态及养殖重点实验室,天津300384

牙鲆 M17蛋白 原核表达 重组蛋白 多克隆抗体

天津市淡水养殖产业技术体系建设项目创新团队项目

ITTMRS2021007

2023

10.3969/j.issn.1006-6500.2023.08.008

天津农业科学
天津农业科学院信息研究所

天津农业科学

影响因子：0.705
ISSN：1006-6500
年,卷(期)：2023.29(8)
  • 3