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猫眼草提取物通过调控miR-501-3p/KPNA4轴影响肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究

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目的 探讨猫眼草提取物对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 猫眼草提取物作用于肝癌Hep3B细胞后,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞增殖蛋白Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、E-钙黏附素(E-cadherin)和核周蛋白 α4(KPNA4)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-501-3p和KPNA4 mRNA表达水平.转染miR-501-3p模拟物至Hep3B细胞,或猫眼草提取物作用于转染KPNA4过表达载体的Hep3B细胞,上述相同方法检测过表达miR-501-3p或过表达KPNA4对猫眼草提取物处理的Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证miR-501-3p与KPNA4调控关系.结果 猫眼草提取物作用Hep3B细胞后,细胞存活率、迁移和侵袭数及CyclinD1、Ki67和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-501-3p表达升高(P<0.05),KPNA4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05).过表达miR-501-3p后,Hep3B细胞存活率、迁移和侵袭数及CyclinD1、Ki67和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05).miR-501-3p在Hep3B细胞中靶向负调控KPNA4表达.过表达KPNA4降低了猫眼草提取物对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响.结论 猫眼草提取物可能通过调控miR-501-3p/KPNA4轴抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭.
Experimental study on the effect of Enphorbia lunulata Bge extract on the prolifera-tion, migration and invasion of hepatocellular carcinoma cells by regulating the miR-501-3p/KPNA4 axis

方健、王辰男、孟庆刚

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北京中医药大学,北京 100029

猫眼草提取物 miR-501-3p 核周蛋白 α4 肝癌 细胞增殖 迁移 侵袭

2020

胃肠病学和肝病学杂志
郑州大学

胃肠病学和肝病学杂志

CSTPCD
影响因子:1.029
ISSN:1006-5709
年,卷(期):2020.29(11)
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