目的 研究趋化因子7[chemokine(C-C motif)ligand 7,CCL7]与肝癌细胞侵袭和迁移能力的关系.方法 培养人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2及正常人肝细胞株L02.ELISA法检测各株细胞CCL7的表达量.CCL7与SMMC-7721细胞共同培养,CCK-8实验、Transwell实验分别检测CCL7对SMMC-7721细胞增殖、侵袭和迁移的影响;制备CCL7小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),聚合酶链反应筛选阳性克隆并鉴定;转染SMMC-7721后,Western blotting、ELISA实验检测其对CCL7基因表达的影响,Transwell实验检测CCL7对SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blotting实验检测不同组别E-cadherin、Vimentin、Twist、Snail、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK的表达水平.结果 CCL7在SMMC-7221和HepG2细胞中的表达显著高于L02细胞中的表达(P<0.01).CCL7共培养后其侵袭能力和迁移能力显著上升(P<0.01),细胞增殖也明显增强,且呈一定时间-浓度依赖性(P<0.05).siRNA抑制SMMC-7721细胞中的CCL7表达水平,24 h转染后,最佳干扰靶点的SMMC-7721细胞中的CCL7表达水平明显被抑制,其侵袭能力和迁移能力显著下降(P<0.01).siRNA组p-ERK、p-JNK、Vimentin、Snail、Twist表达水平显著下降(P<0.01),E-cadherin表达显著上升(P<0.01).共培养组p-ERK、p-JNK、Vimentin、Snail、Twist表达水平显著升高(P<0.01),E-cadherin表达显著下降(P<0.01).ERK/JNK抑制剂组E-cadherin表达水平显著上升(P<0.01),Vimentin、Snail表达显著下降(P<0.01).结论 在肝癌细胞SMMC-7721中CCL7可能通过ERK/JNK通路调控上皮-间质转化(EMT)从而影响其侵袭和迁移能力.
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