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荧光素酶编码基因luc在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化

Cloning, Expression and Purification of Firefly Luciferase in E.coli

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以荧光虫荧光素酶报告载体pXP2 DNA为模板,扩增得到编码萤火虫荧光素酶(LUC)的基因(luc),构建了诱导型表达载体pQE30-luc.将载体导入 E.coli M15获得高效诱导表达萤火虫荧光素酶基因的重组菌M15/pQE30-luc.SDS-PAGE电泳分析显示:重组蛋白的相对分子质量为 60 000 ,表达量占全菌胞内可溶性蛋白质的50.9 %. 利用表达载体pQE30上的His*Tag标记选用Ni柱纯化表达具有活性的萤火虫荧光素酶(LUC),纯化后比酶活达到1.43×10 9 RFU/ mg,纯化倍数达10.6倍,回收率为25.3%.

夏蕾、饶志明、沈微、方慧英、诸葛健

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江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214122

萤火虫荧光素酶 克隆 表达 纯化

国家自然科学基金国家高技术研究发展计划(863计划)江苏省自然科学基金教育部长江学者和创新团队发展计划

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2008

食品与生物技术学报
江南大学

食品与生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.674
ISSN：1673-1689
年,卷(期)：2008.27(5)
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