摘要
目的:对比脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射及盲肠结扎穿刺(cecum ligation and puncture,CLP)诱导脓毒血症肾损伤建模方法的肾脏损伤情况及炎症过程特点.方法:将48只8～10周龄C57BL/6雄性小鼠分为LPS组(n = 16),磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline,PBS)组(n=8),CLP组(n= 16)和假手术组(sham组,n=8).LPS组根据小鼠体质量注射LPS溶液20 mg/kg(浓度1 mg/ml),PBS组注射等量PBS,CLP组在距结肠末端1 cm行结扎术,并用21号针对穿两孔后关闭腹腔,sham组仅开腹暴露盲肠闭合腹腔.分别在建模后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h处死小鼠,比较观察期内各组小鼠肾功能指标、病理损伤及炎症指标变化.用免疫荧光染色观察肾小管上皮细胞的凋亡.结果:PBS组及sham组小鼠建模前后血清肌酐、尿素氮水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而LPS组和CLP组小鼠肌酐、尿素氮迅速升高,均在24 h达峰值,分别与建模前比较,差异有统计学意义(均P＜0.05),且48 h后均逐渐恢复.肾脏病理检查提示,LPS组及CLP组均显示肾小管上皮细胞空泡形成明显增多,小管坏死及凋亡不明显,但炎症反应过程有显著差别,其中LPS组白介素6、肿瘤坏死因子等炎症因子水平较CLP组迅速升高,6 h达到峰值后逐渐降低,且CLP组下降较LPS组缓慢.细胞凋亡染色显示LPS组和CLP组均存在局部凋亡,而PBS组和sham组均未见明显凋亡.结论:LPS腹腔注射及CLP均能成功建立脓毒血症肾损伤模型,其中LPS模型的全身性炎症反应剧烈,重复性好,而CLP模型更贴近临床败血症的炎症特点,在科研实践中可根据需要选择合适的模型.
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