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嵩草AFLP分析体系的建立及引物筛选

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[目的]建立一套适用于嵩草的AFLP技术体系.[方法]参考前人在其他物种上的研究结果,对嵩草AFLP体系的影响因素(包括模板DNA的制备、Mse Ⅰ/EcoR Ⅰ以及T4 DNA连接酶的浓度、反应时间以及反应体系的组成等)进行研究,建立适用于嵩草的AFLP分析体系,并对引物进行了筛选.[结果]用于酶切的嵩草基因组DNA模板以600 ng为宜,连接最适反应时间为10 h,预扩增产物最适稀释倍数为5倍.E-ACC+M-CAG、E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG 3对引物均适合于嵩草AFLP分析,其中以E-ACA+M-CAG引物组合效果最佳,扩增出101条多态性带,多态性带比率为99.02%.[结论]建立的AFLP技术体系可用于嵩草AFLP分析,用该体系可得到条带清晰多态性好的嵩草AFLP指纹图谱.适合嵩草种质资源研究的引物组合有E-ACC+M-CAG,E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG,其中E-ACA+M-CAG组合的效果最好.
Establishment of AFLP reaction system and screening of primer pairs on Kobresia

郑红梅、呼天明、王佺珍、张国云、宋江湖、胡晓宁

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西北农林科技大学,资源环境学院,陕西,杨凌,712100

西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100

西北农林科技大学,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100

嵩草 AFLP体系 引物筛选

科技部国际科技合作项目西藏自治区科技攻关项目

2006DFA336302005011

2008

西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北农林科技大学

西北农林科技大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.893
ISSN：1671-9387
年,卷(期)：2008.36(3)
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