以药源植物穿龙薯蓣种子为外植体,构建优化种子消毒时间以及愈伤组织、不定芽和生根诱导等激素浓度、组成和配比体系,并比较组培苗的叶片、缠绕茎和根状茎等营养器官与实生苗在解剖结构上的差异,初步建立以种子为外植体的再生体系.结果表明:(1)外植体采用2％NaClO消毒15 min和18 min为宜;愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-1 2,4-D时效果最佳,出愈率为83.33％;不定芽诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1 NAA,诱导率达到90.00％;以 1/2MS+0.5 mg·L-1NAA 进行生根培养为宜,生根率达86.70％,组培苗可产生13.2条根,且组培苗生长旺盛,叶片浓绿,茎粗长.(2)组培苗与实生苗在叶片、缠绕茎的解剖结构上存在显著差异:组培苗叶片薄,主脉维管束小,栅栏组织厚度/海绵组织厚度P/S低;组培苗缠绕茎的内径、导管面积和维管束数量均小于实生苗,导管/维管束为0.06,为实生苗的1/2;组培苗缠绕茎皮层比例大,但厚角组织与厚壁组织分化不完全,仅存在排列极为分散的双韧维管束.研究认为,组培苗在外形和结构上的变化主要是对其高湿、低光、恒温、密闭培养瓶培养环境的高度适应的结果.
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