摘要
该研究以黑果枸杞(L ycium ruthenicum)无菌苗为材料,建立了愈伤组织来源的原生质体再生体系,采用ISSR和FCM技术对再生植株进行了遗传稳定性分析.结果 表明:(1)黑果枸杞叶片愈伤组织是产生原生质体的最好材料,在含0.5 mg·mL-1甘露醇的酶液中,继代1次的叶片愈伤组织中原生质体产量为7.77×106个·g-1,活力为92％.(2)改良MS培养基-固体液体双层培养(MS2-固液双层)是培养原生质体的最好方式,培养10d的原生质体分裂频率为45.9％,培养20 d的细胞团形成频率为22.9％.(3)在1.5 mg·mL-16-BA+0.1 mg·mL-1 IBA+ MS培养基中,叶片愈伤组织产生的原生质体可分化获得再生植株.(4)ISSR分析显示,再生植株的平均遗传相似系数为0.88;FCM显示再生植株为二倍体,与亲本植株一致.该研究结果为进一步研究枸杞体细胞杂交技术转移野生植物抗逆遗传性状提供科学依据,为枸杞优良品种的选育奠定了基础.
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