摘要
m6A修饰是mRNA上含量最丰富的一种修饰,调控mRNA的命运决定.YT521-B同源性(YTH)结构域蛋白是一类典型的m6A"阅读器",能识别并结合m6A,完成基因的转录后调控.为了探究拟南芥YTH结构域蛋白ECT6和ECT7的功能及其分子机制,该研究对ect6、ect7和ect6 ect7双突变体进行基因型和半定量PCR鉴定及开花表型观察,通过细胞学观察分析ECT6和ECT7的亚细胞定位,并采用qRT-PCR检测开花关键基因的表达量.结果显示:(1)ECT6基因组包含5个外显子和4个内含子,ect6突变体分别插入在ECT6基因的第3和第5外显子;ECT7基因组包含6个外显子和5个内含子,ect7突变体分别插入在ECT7基因的第4和第6外显子.(2)突变体ect6和ect7均为完全敲除的功能缺失突变体,在长日照下二者均表现出开花提前和叶片数减少.(3)在长日照和短日照下ect6 ect7双突变体均表现出开花提前和叶片数减少.(4)开花抑制基因FLC和成花素基因FT是关键的开花调控因子,qRT-PCR分析结果显示,在ect6 ect7双突变体中,FLC的表达水平降低,FT的表达水平升高,且春化通路基因VIN3、VRN2、VRN5和自主通路基因FVE的表达水平也显著升高.(5)ECT6和ECT7均定位于细胞核和细胞质中.
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