西北植物学报2023，Vol.43Issue(8) ：1261-1267.DOI:10.7606/j.issn.1000-4025.2023.08.1261

'沙糖橘'S蛋白同源基因CrSPH的克隆与表达分析

Cloning and Expression Analysis of the S-protein Homologous Gene(CrSPH)from'Shatangju'

吴秀兰 唐文武 徐呈祥 李桂花
西北植物学报2023，Vol.43Issue(8) ：1261-1267.DOI:10.7606/j.issn.1000-4025.2023.08.1261
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'沙糖橘'S蛋白同源基因CrSPH的克隆与表达分析

Cloning and Expression Analysis of the S-protein Homologous Gene(CrSPH)from'Shatangju'

吴秀兰 1唐文武 2徐呈祥 2李桂花3
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作者信息

  • 1. 肇庆学院食品与制药工程学院,广东肇庆526061
  • 2. 肇庆学院生命科学学院,广东肇庆526061
  • 3. 广东省农业科学院蔬菜研究所,广州510640
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摘要

柑橘自交不亲和由S位点基因控制,前期SSH文库中筛选出1个自交不亲和相关的S蛋白同源基因(S-protein homologous gene,SPH),但其功能尚不明确.研究以'无籽沙糖橘'和'沙糖橘'为材料,利用反转录PCR技术克隆CrSPH基因,通过qPCR技术分析该基因表达特性,并进行原核表达和花粉萌发实验.结果表明,(1)CrSPH的CDS长度为417 bp,编码138个氨基酸,两材料间的CDS区存在3个碱基替换,引起2个氨基酸突变.(2)Southern杂交实验表明,CrSPH基因在两材料基因组中均以单拷贝形式存在.(3)qPCR实验表明,CrSPH基因在'沙糖橘'花器官不同部位表达差异显著,子房中表达量最大,花瓣、花丝等组织中表达量均较低;在高表达的子房中,'沙糖橘'表达量是'无籽沙糖橘'的16倍,表明CrSPH基因在'沙糖橘'中具有高度的组织表达特异性.(4)CrSPH基因在异交授粉第6,7天表达量最高,与其他时段差异均达到显著水平,第6天表达量是第1天表达量的12.4倍.(5)原核表达实验成功诱导出CrSPH蛋白,离体花粉萌发实验表明,随着异源'无籽沙糖橘'CrSPH蛋白浓度的增加,'无籽沙糖橘'萌发率受到显著的抑制.研究表明,CrSPH基因具有表达特异性,可能与柑橘自交不亲和有关.

关键词

'沙糖橘'/CrSPH/表达分析/花粉萌发/自交不亲和

Key words

'Shatangju'/CrSPH/expression analysis/pollen germination/self-incompatibility

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基金项目

国家外专局项目(QN2022030025L)

肇庆学院博士科研启动基金(611-612281)

出版年

2023
西北植物学报
西北农林科技大学,陕西省植物学会

西北植物学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.031
ISSN：1000-4025
参考文献量5
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