摘要
目的：探讨乙肝病毒X基因（HBx）与环耙明在肝癌细胞增殖及VEGF- A表达的影响。方法酶切鉴定pRNAi- HBx质粒。采用pRNAi- HBx质粒载体，选择稳定表达HBx基因的HepG2.2.15细胞，分7组，空白对照组、空载体（pRNAi- NC）对照组、pRNAi- HBx载体转染组以及pRNAi- HBx载体加5μmol/Lol/L、15μmol/Lol/L、25μmol/Lol/L浓度环耙明组，采用pRNAi- HBx载体转染HepG2.2.15细胞并沉默细胞中HBx基因表达，24h后再用环耙明处理24h、48h及72h，采用MTT检测细胞增殖情况；Real- timePCR法检测细胞中HBx、VEGF mRNA表达水平。结果1、酶切结果显示pRNAi- HBx质粒构建正确；2、pRNAi- HBx质粒对HepG2.2.15细胞活性及HBx mRNA转录抑制最强达到40.9%；与空白组相比转染组及联合处理组的HBx mRNA表达明显下降（P<0.01），联合处理组比单独RNA干扰的HepG2.2.15细胞活性及VEGF- A mRNA转录抑制更明显。结论1、RNAi干扰HBx基因对HepG2.2.15细胞的增殖活性有抑制作用。2、环耙明可增强RNAi干扰HBx基因下调HepG2.2.15细胞中VEGF- A mRNA水平的作用。
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