多酶一步纯化共固定系统的构建及催化不对称还原合成手性醇的研究
Construction of a multi-enzyme one-step purification co-immobilization system to catalyze asymmetric reduction for synthesis of chiral alcohols
宋浩雷 1欧阳亚萍 2原泉 2王天尧 2马丽2
作者信息
- 1. 河北亚诺生物科技股份有限公司,河北石家庄 050035;河北工业大学化工学院,天津 300401
- 2. 河北工业大学化工学院,天津 300401
- 折叠
摘要
开发了一步纯化共固定老黄酶(OYE1)、醇脱氢酶(ADH-A)和葡萄糖脱氢酶(GDH)系统并一锅级联催化烯酮转化为手性醇类化合物,同时实现辅酶的原位再生.以镍离子金属螯合亲和层析介质(Ni-NTA)修饰的Si02纳米花为载体,对带有His-tag的目的蛋白ADH-A、OYE1和GDH粗酶液进行一步分离纯化及固定化,并在优化的反应条件下进行反应,对手性醇产物的产率最高可达92.37％.固定化酶相比于游离酶的稳定性更加出色.在连续5次循环使用后,固定化酶在使用时仍有较高的转化率.同时,固定化酶OYE1&ADH-A&GDH@Ni-NTA@SiO2对环状、链状及芳香族烯酮类化合物均具有良好的催化性能.
关键词
老黄酶/不对称合成/一步纯化固定化/多酶级联/手性化合物Key words
old yellow enzyme/asymmetric synthesis/one-step purification immobilization/multi-enzyme cascade/chiral compounds引用本文复制引用
基金项目
河北省自然科学基金(B2020202036)
河北省省级科技计划(22372802D)
出版年
2023
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