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LSEC、Raw264.7、Hepa1-6三种鼠源细胞系cGAS-STING信号通路的本底表达及激活研究

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目的 研究小鼠肝窦内皮细胞(LSEC)、小鼠巨噬细胞(Raw264.7)和小鼠肝癌细胞(He-pa1-6)cGAS-STING信号通路的本底表达及激活感染情况.方法 将LSEC、Raw264.7和Hepa1-6三种细胞培养过夜,使用激活剂poly(dA:dT)、2,5-己酮可可碱(DMXAA)刺激,人肝癌细胞(HepG2.2.15)上清液浓缩纯化后的乙型肝炎病毒(HBV)感染,12 h后收集细胞提取RNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测LSEC、Raw264.7、Hepa1-6细胞cGAS-STING信号通路关键基因cGAS、STING、IFN-β的mRNA水平和cGAS、STING、IRF3及磷酸化IRF3蛋白水平.结果 LSEC的本底表达量最高.Poly(dA:dT)可显著提高3种细胞IFN-βmRNA的表达(P<0.01);DMXAA可显著提高三种细胞cGAS、STING mRNA的表达(P<0.05),促进了STING和IRF3蛋白的磷酸化.HBV可显著抑制Raw264.7、Hepa1-6细胞IFN-βmRNA的表达(P<0.01),显著激活LSEC细胞的cGAS、IFN-βmRNA的表达(P<0.01)并促进STING和IRF3蛋白的磷酸化.结论 三种细胞cGAS-STING信号通路的本底表达、激活、感染存在明显差异.
Background expression and activation of cGAS-STING signaling pathways in LSEC, Raw264.7 and Hepa1-6 cells murine cell lines

周钰婷、张勇、杨建、李飞

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新疆医科大学药学院,乌鲁木齐830011

桂林医学院附属医院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室,广西桂林541001

桂林医学院附属医院广西神经鞘脂代谢相关疾病基础研究重点实验室,广西桂林541001

cGAS-STING信号通路 STING激活剂 肝细胞系

国家自然科学基金面上项目

81873185

2022

10.3639/j.issn.1009-5551.2022.05.003

新疆医科大学学报
新疆医科大学

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CSTPCD
影响因子：0.76
ISSN：1009-5551
年,卷(期)：2022.45(5)
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