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不同血清对LPS和PDGF-BB诱导的大鼠肝星状细胞增殖和活化的影响

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目的 探讨血清种属、浓度和是否灭活对脂多糖(LPS)和血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)诱导大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和活化的影响.方法 分别用0、5、10、30、60、100％的胎牛血清、大鼠灭活血清和大鼠未灭活血清培养HSC-T6细胞作为空白组,在各组空白组中分别加入LPS(5μg/mL和10 μg/mL)和PDGF-BB(10 ng/mL和20 ng/mL)作为模型组.用CCK-8法测定细胞增殖率;用免疫荧光法测定胶原Ⅲ(Collagen Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β(TGF-β)和基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的表达;用ELISA法测定细胞上清肝纤维化指标Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅲ 型前胶原(PCⅢ)的含量.结果 LPS和PDGF-BB都能不同程度的诱导HSC-T6增殖和活化,且有浓度依赖性,浓度越高增殖和活化作用越强;同一个血清浓度下胎牛血清组细胞增殖作用高于大鼠血清组,30％血清以下浓度组增殖作用强于高浓度血清组,大鼠灭活血清组增殖作用强于大鼠未灭活血清组;胎牛血清组Collagen Ⅲ、α-SMA的表达显著升高(P＜0.01),大鼠灭活血清组CollagenⅢ、TGF-β、TIMP-1的表达显著升高(P＜0.05),大鼠未灭活血清组TIMP-1的表达显著升高(P＜0.05);胎牛血清组细胞上清Ⅳ-C、LN、HA和PC Ⅲ含量变化明显(P＜0.05),而大鼠灭活血清组和大鼠未灭活血清组变化较小,且PDGF-BB诱导Ⅳ-C、LN、HA和PCⅢ表达受血清种类影响小于LPS.结论 血清的种属、浓度和是否灭活都能不同程度地影响LPS和PDGF-BB诱导的大鼠肝星状细胞增殖和活化,PDGF-BB模型的增殖和活化受血清影响小于LPS模型,在进行血清药理学实验时应选择合适的模型,并考虑血清本身对细胞的影响.
Effects of different serum on proliferation and activation of hepatic stellate cells induced by LPS and PDGF-BB in rats

王杨静楠、杨建华、赵耀、李茜、胡君萍

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新疆医科大学药学院,乌鲁木齐830017

新疆医科大学第一附属医院,乌鲁木齐830054

体外肝纤维化模型 肝星状细胞 血清

国家自然科学基金新疆天然药物活性组分与释药技术重点实验室项目

81860745XJDX1713

2022

10.3969/j.issn.1009-5551.2022.10.001

新疆医科大学学报
新疆医科大学

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CSTPCD
影响因子：0.76
ISSN：1009-5551
年,卷(期)：2022.45(10)
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