摘要
目的 探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)H19在人单核细胞THP-1源巨噬细胞脂质蓄积中的作用及可能的分子机制.方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育诱导成为泡沫细胞,构建体外动脉粥样硬化(泡沫细胞)模型.利用LipofectamineTM3000转染试剂,将H19小干扰RNA(siRNA)转染到THP-1细胞以沉默H 19基因;油红O染色及异丙醇提取定量的方法检测细胞内脂质蓄积程度;实时荧光定量PCR检测LncRNA H19 mRNA表达水平;Western blot检测过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR-α)蛋白表达水平.结果 油红O染色及胆固醇检测结果提示泡沫细胞模型构建成功.RT-PCR检测显示,ox-LDL诱导成功的THP-1源泡沫细胞模型中LncRNA H19 mRNA相对表达量明显增加(P<0.01),而在H19 siRNA沉默后,THP-1源泡沫细胞中脂质含量明显减少(P<0.01).West-ern blot检测结果发现,ox-LDL刺激后与对照组相比,PPAR-α蛋白表达水平明显降低,而在H19 siRNA沉默组,PPAR-α蛋白表达水平显著回升(P<0.01).结论 LncRNA H19在THP-1来源泡沫细胞中高表达,从而抑制PPAR-α的表达,进而增加THP-1来源巨噬细胞的脂质吞噬,可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点.